光吸收遵循的是比爾-朗伯定律（Beer–Lambert law），吸光度=吸光系數*吸收介質的厚度*吸收介質的濃度  即A=abc，其中A為吸光度，a為吸光系數，b為厚度，c為樣品的濃度。影響吸光度的因數是b和c。a是與溶質有關的一個常量。

同時，因為儀器都有一個測量上限，很多時候溶液都需要進行稀釋。理論上如果都在測量范圍內，稀釋也沒有操作錯誤，根據不同稀釋倍數測試出來的原液結果應該都是一樣的。

當一束光通過一個吸光物質（通常為溶液）時，溶質吸收了光能，光的強度減弱。吸光度就是用來衡量光被吸收程度的一個物理量。吸光度用A表示。A=abc，其中a為吸光系數，單位L/(g·cm)，b為光在樣本中經過的距離（通常為比色皿的厚度），單位cm，c為溶液濃度，單位g/L。A=Ecl。

濃度使吸光度變化的原理：

符號A，表示物質對光的吸收程度。lg(I0/I1)式中I0是通過均勻的液體介質的一束平行光的入射光的強度；It是透射光強度；T是透射比。A值越大，表示物質對光的吸收越大。

根據比爾定律，吸光度與吸光物質的量濃度c成正比，以A對c作圖，可得到光度分析的校準曲線。在多組分體系中，如果各組分的吸光質點彼此不發生作用，那么吸光度便等于各組分吸光度之和，這一規律稱吸光度的加和性。